鑒定新聞
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親子鑒定位點(diǎn)檢測結(jié)果是如何得出來的?(DNA提取物、基因擴(kuò)增儀)
回顧:2004年底,王納文一紙?jiān)V狀將足球明星高峰告上了法庭,稱自己的孩子是同高峰所生,雙方僵持不下,各執(zhí)一詞,讓人無法辨別。最后高峰提出通過親子鑒定的方法,鑒定孩子是不是自己的。這是國內(nèi)首例名人DNA親子鑒定案。 2004年11月18日,北京朝陽區(qū)中級(jí)人民法院在交換證據(jù)時(shí)正式公布了“高峰親子案”的鑒定結(jié)果,根據(jù)DNA檢驗(yàn)顯示:王圣元與高峰有99.9999994%的可能性為親子關(guān)系。
99.9999994%,為什么DNA親子鑒定測試的準(zhǔn)確性會(huì)有這么高?
科學(xué)家在過去的研究中發(fā)現(xiàn),人與人之間的99.99%的遺傳密碼序列都相同,但又存在萬分之一的差別,使每個(gè)人都具備區(qū)別于他人的堿基序列,這就是DNA的多態(tài)性。(每個(gè)人多態(tài)性位點(diǎn)的差別就成為個(gè)人識(shí)別的標(biāo)志)根據(jù)遺傳學(xué)的傳遞規(guī)律,子女的身份標(biāo)記必定來自雙親,據(jù)此可用于親子鑒定。
△基因序列中的atcg四個(gè)堿基
那么,99.99%以上的準(zhǔn)確率是如何得出來的?
目前,鑒定親子關(guān)系用得最多的是DNA分型鑒定。
第一步需要做待檢準(zhǔn)備,待檢物絕對(duì)不能混入其他雜質(zhì)。
第二步就是DNA提取。
目前,最為常見的是通過血斑進(jìn)行DNA鑒定,也就是說,要采集血樣做鑒定。
DNA提取常用方法一般采用“直擴(kuò)法”,也就是采用人類熒光標(biāo)記STR復(fù)合擴(kuò)增試劑盒(試劑盒里包含了DNA提取、擴(kuò)增所需的試劑)進(jìn)行PCR復(fù)合擴(kuò)增。血斑用打孔器打出所需的樣本大小,放入PCR反應(yīng)管中,加入反應(yīng)物緩沖液和引物混合體系,振蕩搖勻。
這是最為費(fèi)錢的一步,因?yàn)樵噭┖惺沁M(jìn)口的,每次加入的試劑費(fèi)用就要數(shù)百元。在進(jìn)入加樣區(qū)之前,實(shí)驗(yàn)人員先打開紫外線消毒燈,對(duì)整個(gè)房間進(jìn)行消毒,確保加樣房間沒有任何的病菌及粉塵等,實(shí)驗(yàn)者也盡量不要說話。
△DNA實(shí)驗(yàn)室
試劑里邊包括酶、引物等試劑,每個(gè)試管要加入0.2微升。加入試劑后,要將小試管放入小的混合器,讓試劑和DNA樣本充分混合。
第四步:擴(kuò)增,DNA提取物不斷繁殖分裂。為了能達(dá)到檢測需求的量,要把小試管放入一個(gè)叫做擴(kuò)增儀的儀器。把試管放入擴(kuò)增儀后,里邊的DNA提取物將不斷繁殖、分裂。在一般情況下,經(jīng)過2-3個(gè)小時(shí)的擴(kuò)增,DNA提取物的量就能達(dá)到檢測量。也就是說,要真正進(jìn)行DNA檢測、比對(duì)了。
第五步:檢測,提取21個(gè)基因位點(diǎn)數(shù)據(jù)進(jìn)行比對(duì)。檢測是在一個(gè)叫做遺傳分析儀進(jìn)行毛細(xì)管電泳和基因分型。這種設(shè)備非常先進(jìn),把擴(kuò)增完的小試管放入儀器后,設(shè)備會(huì)自動(dòng)從試管中提取DNA提取物,然后自動(dòng)選擇DNA位點(diǎn),分析染色體。在一般情況下,設(shè)備會(huì)自動(dòng)提取21個(gè)位點(diǎn),然后,系統(tǒng)自動(dòng)將需要做親子鑒定的兩個(gè)樣本進(jìn)行自動(dòng)比對(duì)。
根據(jù)遺傳學(xué)原理,如果所有的位點(diǎn)遺傳信息都能匹配成功,我們也就能大概說,這對(duì)父子或者母子是親子關(guān)系。當(dāng)然,這只是最簡單、最直觀的看法,要判斷孩子是否親生,還要經(jīng)過更加嚴(yán)謹(jǐn)?shù)挠?jì)算。
計(jì)算時(shí),有個(gè)親權(quán)指數(shù)(PI)計(jì)算,因?yàn)樵摴筋愃朴?p除以p+1)的模式,這個(gè)模式?jīng)Q定其結(jié)果不可能是整數(shù)。而且,因?yàn)槭郎蠜]有絕對(duì)相同的DNA,因此最高只能算出99.99%以上的準(zhǔn)確率。